上海2020年9月25日 /美通社/ -- 2020年9月25日，聚焦于基因治療和細胞藥物研發公司上海邦耀生物科技有限公司（“邦耀生物”）宣布，首次對外公布了與浙江大學醫學院附屬第一醫院合作開展的“PD1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞治療復發難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床試驗”取得突破性成果。這是世界上首次利用基因編輯技術在PD1位點實現定點整合的CART治療，也是全球首例非病毒定點整合CART細胞治療淋巴瘤的臨床試驗。同時，最(zui)新研(yan)究成果已于2020年(nian)9月(yue)23日(ri)在(zai)預印本(ben)平臺medRxiv上公布，由華東師范大(da)學、浙江大(da)學醫學院(yuan)附屬第一醫院(yuan)和上海邦耀(yao)生物共同完成。

PD1定點整合的CD19-CART是邦耀生物利用自主知識產權的Quikin CART?平臺技術，在不使用病(bing)毒載(zai)體(ti)的(de)情況下，一(yi)步制備獲得的(de)CART產品。該產品將PD1免疫(yi)檢查點抑(yi)制和CART腫瘤殺傷(shang)功能合(he)二為一(yi)，起(qi)到了PD1免疫(yi)治療(liao)與CART療(liao)法(fa)聯合(he)應用的(de)效果(guo)。

2例患者在治療3個月后完全緩解

該臨床研究計劃入(ru)組患者(zhe)(zhe)15例，目前已可評估(gu)的4例患者(zhe)(zhe)在(zai)1個月(yue)時均(jun)達(da)到(dao)了部分(fen)緩解(jie)(jie)（PR）的效果，已經達(da)到(dao)3個月(yue)評估(gu)時間的2例患者(zhe)(zhe)獲得完全緩解(jie)(jie)(CR)。

首例獲得(de)完全緩解的患者于2018年診斷為彌漫大(da)B淋巴瘤IVBE期(qi)，經多次放(fang)化療(liao)(liao)治療(liao)(liao)后(hou)(hou)，病(bing)情仍未(wei)(wei)得(de)到(dao)有效控制。入組前影(ying)像(xiang)學顯(xian)示(shi)左下腹小(xiao)(xiao)腸(chang)走形區系(xi)膜間隙大(da)小(xiao)(xiao)為3.6*3.5cm的病(bing)灶，放(fang)射性攝取異常增(zeng)高。2020年5月入組進行PD1敲(qiao)除(chu)非病(bing)毒定(ding)點(dian)整合(he)CD19-CART細(xi)胞的回輸治療(liao)(liao)，治療(liao)(liao)后(hou)(hou)28天(tian)PET-CT影(ying)像(xiang)學即顯(xian)示(shi)FDG代謝較前明顯(xian)減低，達到(dao)PR，治療(liao)(liao)90天(tian)后(hou)(hou)的PET-CT影(ying)像(xiang)學顯(xian)示(shi)病(bing)灶全部消失，FDG代謝未(wei)(wei)見增(zeng)高，達到(dao)CR。

在整個CART治療過(guo)程中未發(fa)生(sheng)3級以(yi)上藥物(wu)相關(guan)不良事件，包括細胞因子風暴和神經毒性。回輸后，CART在體內擴增良好，持續時間較長，D90流式檢測發現外(wai)周血(xue)中(zhong)的CART細(xi)胞仍維持在一定比例(li)。目前2例(li)患者(zhe)已(yi)經痊愈出(chu)院，仍在接受長期(qi)隨訪(fang)。

該項臨床研究的主要研究者（PI）浙江大學醫學院附屬第一醫院黃河院長說：“彌漫性大B細胞淋巴瘤是(shi)最常(chang)見的(de)(de)非霍奇金淋巴瘤，目前(qian)針對(dui)難治(zhi)復發(fa)的(de)(de)患者缺乏有效治(zhi)療(liao)手段(duan)。今年我(wo)(wo)們開始(shi)探(tan)索基于基因編輯技(ji)術的(de)(de)非病毒(du)定點(dian)整合型CART的(de)(de)臨床研(yan)究(jiu)，我(wo)(wo)們非常(chang)高興的(de)(de)看到患者經過治(zhi)療(liao)后迅(xun)速達到完全(quan)緩解狀態，我(wo)(wo)們期(qi)待這一新型的(de)(de)CART技(ji)術會(hui)為(wei)難治(zhi)復發(fa)患者帶來(lai)更加(jia)便捷、安全(quan)和確(que)切的(de)(de)長期(qi)治(zhi)療(liao)效果。”

邦耀生物CART升級2.0版，更有效，更安全

邦(bang)耀生物(wu)的(de)(de)非病(bing)毒定(ding)點整(zheng)合CART技術(Quikin CART?)，可以在不使用病(bing)毒載體的(de)(de)情況(kuang)下(xia)，利用CRISPR/Cas9基因(yin)編輯技術將CAR元件定(ding)點插入到基因(yin)組的(de)(de)特定(ding)位(wei)點，一步實(shi)現基因(yin)敲除和CAR的(de)(de)穩定(ding)整(zheng)合，屬于(yu)邦(bang)耀生物(wu)2.0版CART的(de)(de)管線產品。 

PD-L1/PD1是(shi)抑(yi)制(zhi)T細胞功能(neng)的(de)(de)重要免疫(yi)檢查點，目前(qian)針對PD-L1/PD1的(de)(de)抑(yi)制(zhi)劑已經在多種類型的(de)(de)惡(e)性(xing)腫瘤中取得了(le)(le)良好(hao)的(de)(de)療(liao)(liao)效(xiao)，也有不少研究(jiu)報道了(le)(le)PD1敲除(chu)可(ke)有效(xiao)增強(qiang)CART細胞的(de)(de)功能(neng)。非(fei)霍(huo)奇金淋(lin)巴(ba)瘤是(shi)一種原發于淋(lin)巴(ba)組織的(de)(de)血液系統惡(e)性(xing)腫瘤，占所有淋(lin)巴(ba)瘤80%-90%，雖然患者在初次(ci)治療(liao)(liao)后(hou)疾病得到緩解，但之后(hou)往往出現復發。雖然已有CART產品(pin)獲批用于復發難治性(xing)非(fei)霍(huo)奇金淋(lin)巴(ba)瘤的(de)(de)臨床治療(liao)(liao)，但是(shi)總(zong)體療(liao)(liao)效(xiao)依(yi)然有限(xian)，而有研究(jiu)提示抑(yi)制(zhi)PD1通路(lu)可(ke)能(neng)會帶來更好(hao)的(de)(de)臨床效(xiao)果。

因此，邦耀生物利用(yong)Quikin CART?平(ping)臺開(kai)發(fa)了非病毒PD1定點整合CD19-CART細(xi)(xi)胞，開(kai)展(zhan)復(fu)發(fa)難治(zhi)性非霍(huo)奇金(jin)淋巴瘤的(de)臨(lin)(lin)床(chuang)治(zhi)療。該產品具有(you)CAR均(jun)一(yi)性穩定表達、PD1基(ji)因敲除的(de)兩大優勢，相當于PD1抑制劑和CART細(xi)(xi)胞的(de)強強聯(lian)手。在目前已經開(kai)展(zhan)的(de)多例臨(lin)(lin)床(chuang)試驗中，該CART產品體(ti)現了出(chu)色的(de)安全性和有(you)效性。

傳統CART產品的(de)(de)(de)制(zhi)備(bei)主要使用病毒載體(ti)，對(dui)病毒制(zhi)備(bei)工(gong)藝提出了(le)(le)很(hen)高(gao)的(de)(de)(de)要求，這(zhe)大大增加了(le)(le)CART細胞(bao)的(de)(de)(de)制(zhi)造(zao)成本(ben)和難(nan)度，阻礙了(le)(le)CART治療的(de)(de)(de)大規模臨床應用；并且(qie)價格十分昂貴，如(ru)目前上市的(de)(de)(de)CART產品，諾華的(de)(de)(de)Kymriah定(ding)價為(wei)47.5萬美元，Kite的(de)(de)(de)Yescarta定(ding)價為(wei)37.3萬美元；此(ci)外，由于(yu)病毒采用隨(sui)機插入的(de)(de)(de)方式(shi)將CAR元件整(zheng)合(he)到細胞(bao)基(ji)因(yin)組中，可能會改變(bian)(bian)正常基(ji)因(yin)的(de)(de)(de)表達，存在(zai)癌變(bian)(bian)的(de)(de)(de)安全(quan)隱患。Quikin CART?技術(shu)無(wu)需采用病毒載體(ti)進行細胞(bao)制(zhi)備(bei)，極大減少了(le)(le)CART產品的(de)(de)(de)生產成本(ben)，同時避免(mian)了(le)(le)隨(sui)機插入的(de)(de)(de)癌變(bian)(bian)風險。 

Quikin CART?技(ji)術(shu)只需一步即可(ke)同時實現(xian)T細(xi)胞(bao)內(nei)源基因的(de)(de)(de)調控和CAR的(de)(de)(de)持續性表(biao)達。相(xiang)比于(yu)其他(ta)CART技(ji)術(shu)，具有工藝簡單、生(sheng)產環節少、制備時間短、產品(pin)均一性高等優點(dian)。該技(ji)術(shu)平臺可(ke)以用于(yu)多個免疫檢查點(dian)敲除增強型CART細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)制備，可(ke)以快速生(sheng)產通用型CART細(xi)胞(bao)，可(ke)以開發動態調控的(de)(de)(de)安全型CART產品(pin)等，為今后(hou)CART細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)多樣(yang)化(hua)改造提供了強有力(li)的(de)(de)(de)技(ji)術(shu)支持。 

邦耀生物首席科學家，華東師范大學生命科學學院劉明耀教授表示：“與傳統的(de)(de)(de)自體CART技術相比，Quikin CART? 技術可以在不使(shi)用病毒的(de)(de)(de)情(qing)況下(xia)，一(yi)步實現CAR元件在基因(yin)(yin)組的(de)(de)(de)定點(dian)整(zheng)合(he)和T細(xi)(xi)胞內(nei)源基因(yin)(yin)的(de)(de)(de)調(diao)控干預。這(zhe)意味著CART細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)制(zhi)(zhi)備(bei)(bei)工藝(yi)、生產環節(jie)、制(zhi)(zhi)備(bei)(bei)時間都會大(da)大(da)簡化(hua)和縮(suo)短，因(yin)(yin)此極大(da)降低了(le)CART細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)生產成本，同時減(jian)少了(le)病毒隨機插入引起的(de)(de)(de)致瘤(liu)風險(xian)，也提高了(le)CART產品的(de)(de)(de)均一(yi)性。目前(qian)結果顯示我(wo)們(men)制(zhi)(zhi)備(bei)(bei)的(de)(de)(de)非病毒PD1定點(dian)整(zheng)合(he)CD19-CART細(xi)(xi)胞具有(you)巨大(da)的(de)(de)(de)治療潛力(li)，在臨床試驗(yan)中表現出了(le)很好的(de)(de)(de)安全性和緩解率。” 

該項目主要負責人、論文第一作者，邦耀生物創新CART研發總監，華東師范大學生命科學學院副研究員張楫欽博士說：“近年(nian)來(lai)，CRISPR/Cas9基因編(bian)輯技術(shu)(shu)的(de)(de)(de)不(bu)斷成熟和發展(zhan)讓我(wo)們(men)萌生(sheng)了將其應用于CART治療的(de)(de)(de)想(xiang)法。通過(guo)對(dui)現有CART技術(shu)(shu)存(cun)在問題的(de)(de)(de)深(shen)入(ru)剖析，我(wo)們(men)意識到利用基因編(bian)輯技術(shu)(shu)來(lai)制備非(fei)病毒(du)定點整合CART細胞是一(yi)個很(hen)有潛力的(de)(de)(de)方(fang)(fang)向。通過(guo)大(da)量(liang)的(de)(de)(de)方(fang)(fang)法嘗(chang)試(shi)和條件(jian)摸索，我(wo)們(men)建立了成熟的(de)(de)(de)Quikin CART?技術(shu)(shu)平(ping)(ping)臺。該技術(shu)(shu)不(bu)需要(yao)使用任何病毒(du)，只需一(yi)步(bu)即可(ke)制備出(chu)CART細胞，具有現有CART技術(shu)(shu)不(bu)可(ke)比擬的(de)(de)(de)諸多(duo)優勢(shi)。期待今后利用這一(yi)技術(shu)(shu)平(ping)(ping)臺能開發出(chu)更多(duo)成功(gong)的(de)(de)(de)CART產品(pin)，在臨(lin)床治療上取(qu)得(de)更大(da)的(de)(de)(de)突破。” 

除了(le)正在開展的(de)非(fei)病(bing)毒PD1定點(dian)整合CD19-CART臨(lin)床(chuang)研究，邦耀生物(wu)也正在布局針對(dui)實(shi)體瘤的(de)其他(ta)非(fei)病(bing)毒定點(dian)整合CART產品(pin)，以期在CART療法上(shang)取得(de)更大的(de)突破。